鼠疫IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
鼠疫IgM抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
使 用 说 明(96T/48T) [原理]
科研试剂编辑:{深圳市恒昊生物科技有限公司}
本试剂盒采用亲和素-生物素化鼠疫纯化抗原预 包被板 ELISA 原理,检测人血清中存在的鼠疫 IgG 抗体,并配以酶标记抗人 IgG 单克隆抗体作为标记物。 加入底物 TMB 显色后终止反应,在 450nm波长测各 孔 O.D 值 , O.D 值 的 大 小 与 待 检 抗 体 含 量 成 正 比。生物素系统(biotin-avidin system)的稳固级联放 大作用,使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提 高是本试剂含有的独特优点。
[用途]
本试剂盒用于定性检测人血清中的鼠疫 IgG 抗 体,用于鼠疫菌苗接种后效果监测和流行病学调研。
[适应范围]
疫苗接种后效能监测。
流行病学调研和既往感染的诊断。
[贮存条件及有效期]
试剂置 2~8℃密封保存,避免冻结。有效期 12 个 月。
[适用仪器]
各类国产和进口酶标仪均可使用,检测波长 450nm。 [试剂盒组成]
1 、生物素化抗原预包被板 1 块(8X12/4X12)
2 、阴性对照 1 瓶(直接使用)
3 、阳性对照 1 瓶(直接使用)
4 、标本稀释液
1 瓶(22/11 ml ,直接使用)
5 、酶结合物 1 瓶(12/5ml ,直接使用)
6 、浓缩洗涤液(30X)
1 瓶(20/10ml,加蒸馏水 1:30 稀释使用)
7 、显色剂 A 、B 各 1 瓶(5/3ml)
8 、终止液(2M H2SO4 ) 1 瓶(5/3ml)
9 、说明书 1 份 [操作步骤]
1 、将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封。
2 、标本稀释:用标本稀释液以 1 : 101(2ul 标本 —200ul 标本稀释液)稀释标本。于反应板中加 已稀释待检标本及阴阳性对照(100ul)各一孔, 设空白对照一孔(加 100ul 标本稀释液)轻拍混 匀。
3 、37℃温育30 分钟。甩去孔内液体,用洗涤液洗 板 3 次并在吸水纸上拍干。
4 、加酶结合物:每孔 2 滴,混匀后置 37℃温育 3 分钟。同上法洗涤 3 次并拍干。
5、显色:每孔加显色剂 A、B 各一滴,轻拍混匀(或 震荡器混匀)后置 37℃10 分钟。
[结果判断]
1 . 目测:在白色背景下观察各孔显色情况,蓝色者 为阳性,无色者为阴性。
2 . 酶标仪测定:每孔加终止液一滴,混匀后在 450nm 下测定各孔 O.D 值。
1 S/N=标本 O.D 值/阴性对照 O.D 值。
2 S/N≥2. 1 为阳性;
3 S/N<2. 1 为阴性
4 阴性对照(NC)小于 0.10 时以 0. 10 计算, 大于
0. 1 小于 0.21 时以实际 O.D 值计算 ;若大于
0.21 时, 实验可能出现了较大误差, 需重复实 验。